Ациламидазная активность

Испытуемую культуру выращивают на питательной среде Левенштейна-Иенсена или Гельберга. Присутствие формамидазы определяется к моменту наиболее пышного роста (у медленно растущих — на 15-20-й день, у быстрорастущих — на 6-7-й день). Бактериальную массу (две больших петли) снимают с поверхности среды, переносят в центрифужную пробирку, тщательно растирают стеклянной палочкой и добавляют фосфатный буфер рН 7,2. К 0,5 мл бактериальной суспензии добавляют 0,5 мл раствора формамида (0,2 мл на 500 мл дистиллированной воды) и помещают в термостат на 5 часов при 37°. Аммиак, образующийся при ферментации формамида, определяют с помощью известной реакции между аммиаком, фенолом и гипохлоритом в щелочной среде, при которой образуется синего цвета индофенол. Ход реакции следующий: после инкубации к исследуемой смеси добавляют 0,2 мл 0,07% водного раствора MnSo4, 2 мл раствора фенола и 1 мл раствора гипохлорита. Пробирки помещают в кипящую водяную баню на 5 минут. Реакция читается после охлаждения. Синее окрашивание указывает на присутствие аммиака. Ингредиенты для этой реакции готовят по Russel. При определении формамидазной активности рекомендуется проводить контрольные исследования: определять наличие аммиака в опытах без формамида, а также возможное спонтанное присутствие формамидазы (реакция ставится без бактериальной суспензии). Проверочные исследования (М. М. Дыхно и др.) показали, что кислотоупорные сапрофиты неизменно дают положительную реакцию с формамидом (синее окрашивание). Микобактерий туберкулеза человеческого типа, а также бычьего и птичьего типов формамидазной активностью не обладают (реакция отрицательная). Атипичные микобактерий обычно не обладают формамидазной активностью и дают отрицательные реакции, что сближает их с истинными микобактериями туберкулеза. Гидролиз твина. Для дифференциации микобактерий II и III групп показательна реакция гидролиза Твина (Wayne, 1964).

Комментарии запрещены.

О химии и химиках
  • Выращивание кристаллов

    15.10.2020

    Приготовьте в стакане насыщенный раствор соли. Для этого добавляйте соль в тёплую воду и размешивайте до тех пор, пока соль не перестанет растворяться. Для роста кристалла необходима затравка — крупный кристалл соли, на... 

  • «Тяжелая» вода

    15.10.2020

    Установите подставки по разным сторонам аквариума, наполните пузырьки холодной и горячей водой. Добавьте красители — синий и красный. Прикройте пальцами оба пузырька, одновременно погрузите в аквариум, установив их на... 

  • Прыгающий мыльный пузырь

    15.10.2020

    Наденьте перчатку, затем надуйте пузырь, окунув трубочку или специальное кольцо в мыльный раствор. Когда пузырь будет касаться перчатки, он не лопнет, а лишь отскочит, как воздушный шарик (немного практики и всё получится). Чудо... 

  • Какие опыты можно делать с детьми 7-8 лет дома

    15.10.2020

    Проведение опытов в домашних условиях занятие простое и общедоступное. Демонстрировать их можно детям с раннего возраста, например, запускать самолетики, исследовать песок. С возрастом эксперименты становятся сложнее.... 

  • Как обустроить домашнюю лабораторию для ребенка

    15.10.2020

    Задумываясь о том, чтобы создать дома уголок, где ребенок сможет проводить свои опыты и эксперименты, родителям часто приходится отказываться от подобной затеи.  Читать полностью →